Direkt antiglobulintest

Antiglobulintest, även hänvisad till som Coombs test, är ett ofta används diagnostiskt verktyg som används för detektion av immunohematological och immunologiska störningar. Baserat på tekniken och mål, det finns två varianter av antiglobulintester: den direkt antiglobulintest (DAT) / direkt Coombs test (DCT), och indirekt antiglobulin Test (IAT). Det är viktigt att nämna att direkt antiglobulintest används för att detektera en speciell typ av anemi som orsakas av onormal funktion av immunsystemet. Människokroppen är utrustad för att producera antikroppar för att identifiera och attackera främmande patogener. Men i vissa fall, immunsystem att syntetisera antikroppar som riktar och döda röda blodkroppar (eller röda blodkroppar i kroppen) för att orsaka hemolytisk anemi.

När behöver du att ta en direkt antiglobulintest?

När läkaren är inte säker på om antikropparna är kopplade till dina röda blodkropparna kan direkt antiglobulintest hjälp i en sådan situation. Vanliga scenarier där Din läkare kan rekommendera direkt antiglobulintest inkluderar: efter transfusion tecken på hemolytisk anemi och ibland diagnostisera nyfödda om modern har utvecklat antikroppar mot fetala röda blodkropparna och förde det vidare till barnet under intrauterin liv. Om den lämnas oupptäckt, risken att utveckla livshotande tillstånd som hemolytisk sjukdom hos nyfödda ökar betydligt.

Hemolytiska anemier är oftast på grund av hyperaktivering av immunsystemet som leder till bildningen av antikroppar mot kroppens eget RBCs, som också är känd som autoimmun hemolytisk anemi. Och symptom kan innehålla:

• Andningssvårigheter
• Brist på energi och öka känslan av trötthet
• Mörka urin och gulsot
• Låg RBC räkna med blodprov
• Kalla extremiteter inklusive händer och fötter
• Hjärta frågor som blåsljud eller misslyckande, och oregelbunden hjärt

Hur är direkt antiglobulintest utförd?

Arbetsprincipen DAT

Direkt antiglobulintest hjälper till att upptäcka vivo antikroppsbeläggning av dina röda blodkroppar (antikropparna kan vara IgG eller komplimang eller båda). I blodet, RBC har vissa antigener som erbjuder fäst platser till antikroppar. Varje trigger eller svar som kan aktivera dessa bindningsställen kan stimulera symtomen på hemolytisk anemi. Detta är grunden för HDN (hemolytisk sjukdom hos nyfödda), autoimmun hemolytisk anemi och transfusionsreaktion. Aktiveringen och beläggningen kan också orsakas på grund av vissa mediciner.

I detta test, röda blodkroppar tvättas och inkuberas sedan med humant serum. Denna teknik gör det möjligt för antikroppar att få binder till antigener på RBC. Processen omfattar sedan tvättning och tillsats av anti-humant globulin. Om agglutination inträffar efter tillsats av anti-humant globulin (ibland hänvisad till som Coombs reagens), så är det ett tecken på antikroppsbeläggning över cellerna in vivo. Det är absolut nödvändigt att nämna att både IgG och IgM-antikroppar kan detekteras genom användning av detta test.

Tekniker för DAT

1. Ta patientens RBC från en EDTA (etylendiamintetraättiksyra), som säkerställer provet antikoagulerat.
2. Dispensera en droppe av RBC-suspension (2% -5%) separat i var och en av de 4 provrör, och märka de 4 rören med taggar: Poly, Kontroll, anti-IgG, och anti-C3.
3. Tvätta RBC med koksaltlösning, och sedan luta röret upp och ned för att dekantera saltlösning. Sedan rensa botten av rören med vänster saltlösning, och upprepa detta för tre till fyra gånger. Torka rören med ett absorberande torka.
4. Tillsätt två droppar polyspecifika AHG i "poly" röret, och dispensera två droppar av 6% BSA till "Kontrollera" rör.
5. Skaka försiktigt för att kombinera innehållet i rören, och RBC i varje rör kommer att bilda en pellet eller en knapp som kommer att får testat för agglutinering. Notera resultaten.
6. Om det polyspecifika reagenset visar positiva resultat, kommer specifika tester med anti-IgG-anti-C3-reagens att behövas för att identifiera cellbeläggningen, om det är antikroppen eller komplement eller båda.
7. Dispensera 2 droppar anti-IgG AHG till "anti-IgG" rör, och 2 droppar anti-C3 AHG till "anti-C3" rör. Skaka för att kombinera innehållet.
8. Testet måste vara mycket känslig så vi måste inkubera alla negativa i 5 minuter för ökad beläggning. För att upptäcka svagheter i beläggningen, iaktta alla negativa med mikroskop.
9. Om röd överrör har använts för att samla in prov, då falska positiva resultat kan komma.

• När koagulering inträffar eller det svalnar, är det på grund av svaghet i kalla verkande autoantikroppar inklusive anti-I, tar villkoret plats i In-vitro komplement.
• Undvik lavendel-top rör för att binda upp kalcium- och magnesiumjoner.
• Undvik aktivering av komplement in vitro.

10. Vid positiv DAT, få följande information om patienten:

• Diagnos av vissa sjukdomar
• lämplig medicinering
• History of transfusion av RBC och komponenter i plasma
• Andra tester som visar förstörelse i de röda blodkropparna

För mer information om DAT och IAT, titta på videon nedan:

Hur man ska tolka testresultat

Vi vet att antikroppar fäster RBC när DAT är positiv. Omfattningen av positivitet beror på styrkan av DAT och samtidigt mängden bundna antikroppar. Men om RBC redan förstörts, denna situation inte alltid relatera till svårighetsgrad. I direkt antiglobulintest, är antikroppar detekteras utan att identifiera orsaken och typ av hemolytisk anemi. För att ta reda på orsakerna bakom den, behöver medicinsk historia som ska observeras och läkarundersökning måste utföras, till exempel historia transfusion, läkemedelsreaktion, etc.

Det är viktigt att nämna att en liten del av befolkningen testar DAT positiv utan att uppleva eller manifesterar några tecken på hemolytisk anemi. Om DAT är negativ, antyder det att antikroppar inte är knutna till de röda blodkropparna. Därför kan andra orsaker detekteras och undersökas.

Vissa situationer där DAT är positivt är:

• Autoimmun hemolytisk anemi (på grund av hyperaktivitet av immunförsvaret mot röda blodkropparna)
• Utveckling av antikroppar på röda blodkroppar, är tillstånd som kallas "läkemedelstoxicitet". Den orsakas av vissa läkemedel som innehåller cefalosporiner, levopoda, dapson, nitrofurantion, NSAID som ibuprofen
• När det donerade blodet attackeras av immunsystemet (som en del av transfusionsreaktion)
• De blodgrupper av mor och barn är olika
• Leukemi inklusive kronisk lymfatisk leukemi
• En autoimmun problem kallas lupus
• mononukleos
• Syfilis
• Mykoplasma-infektion.

Ibland resultaten av direkt antiglobulintest kan vara omöjligt även utan sjukdom eller risk. Dessutom kan testet avbrytas av vissa läkemedel och vissa kan orsaka resultaten positiva utan hemolytisk anemi. Vissa läkemedel som kan orsaka hemolytisk anemi är:

• vissa antibiotika
• Insulin
• Vissa särskilt blodtryck mediciner

Dela på sociala nätverk: